Криоплазменное травление сфокусированным ионным пучком
Криоэлектронная томография (cryo-ET) обеспечивает беспрецедентное понимание внутренней структуры клеток, но четкие и достоверные результаты зависят от высококачественной подготовки крио-ламелей. Прибор Thermo Scientific Arctis (Cryo-PFIB) с криоплазменным сфокусированным ионным пучком специально разработан для автоматизированного высокопроизводительного производства крио-ламелей из витрифицированных клеток. Его система автоматической загрузки обеспечивает уникальную прямую связь между подготовкой образцов методом крио-FIB-SEM и просвечивающей электронной крио-микроскопией (cryo-TEM) в рамках рабочего процесса томографии.
Корреляция со световой микроскопией и перемещением в ПЭМ
Встроенный широкопольный флуоресцентный микроскоп (iFLM) позволяет наблюдать одну и ту же область образца с помощью светового, ионного или электронного пучков. Томо-решетки (TomoGrids) специально разработаны для криотомографического процесса и имеют две плоские стороны, обращенные друг к другу. Эти стороны предотвращают смещение во время загрузки в крио-ПЭМ и всегда обеспечивают правильную ориентацию оси ламели относительно оси наклона ПЭМ, начиная от старта травления и заканчивая получением изображений с высоким разрешением. Таким образом, вся доступная площадь ламели может быть использована для сбора данных. Корреляционная система iFLM позволяет получать флуоресцентные изображения в точке совпадения электронного и ионного пучков. Переключение между iFLM и ионным травлением может выполняться без перемещения стола. Возможность наклона гониометра CompuStage на 180 ° позволяет получать изображение верхней и нижней поверхностей образца, что может быть полезно для толстых образцов.
Высококачественные ламели с одинаковой толщиной
Arctis Cryo-PFIB поддерживает сверхчистую рабочую среду в течение нескольких дней, обеспечивая стабильное и высококачественное приготовление ламелей. Плазменный источник ионного пучка может переключаться между ионами ксенона, кислорода и аргона, облегчая изготовление очень тонких ламелей с оптимизированным качеством поверхности. Технология PFIB позволяет использовать различные свойства травления трех доступных ионных пучков для получения высококачественного образца, избегая при этом эффектов имплантации галлия (жидкометаллический ФИП, LMIS). Корпус системы спроектирован с учетом биобезопасности, а для лабораторий более высокого уровня биобезопасности (например, BSL 3) дополнительно доступно решение для тепловой дезактивации.
Компактная камера для отбора проб Arctis Cryo-PFIB специально разработана для крио-операций. Её уменьшенный объем обеспечивает исключительно чистую рабочую среду, которая сводит к минимуму конденсацию воды. Это достигается за счет охлаждения образцов и благодаря их экранированию с помощью специального криобокса, тем самым позволяя проводить поточную пробоподготовку в течение нескольких дней.
Автоматизированная криотомография с высокой пропускной способностью и возможностью удалённого доступа
Автозагрузчик обеспечивает роботизированную загрузку и выгрузку образцов для 12 сеток (томо-решеток или ПЭМ-решеток), облегчая трансфер в крио-ПЭМ, сводя к минимуму риск повреждения и загрязнения образца. В новом пользовательском веб-интерфейсе загруженные сетки сначала отображаются и проверяются. Затем выбираются положения ламелей и определяются параметры травления. Изготовление ламелей выполняется автономно. В зависимости от типа материала образца выбирается источник плазмы, который обеспечивает высокую скорость травления для быстрого удаления материала большого объема. Автозагрузчик обеспечивает защищенную среду для деликатных образцов с крио-ламелями. В частности, избегаются рискованные ручные манипуляции с образцами, которые могут повредить или загрязнить образцы. Кассета загружается в капсулу, пристыкованную к автоматическому загрузчику, который может использоваться с моделями Arctis Cryo-PFIB, Krios или Glacios.
Подробнее о двулучевых системах здесь.
Ссылка на источник здесь.